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Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC)
분리 원리/프로세스에 대해서

PBMC는 Peripheral Blood Mononuclear Cells(외주혈 단핵세포)의 약자입니다. 이것은 혈액 내의 세포 중 하나로, 림프구와 달리 원형 세포핵을 가진 단핵세포를 포함합니다. PBMC는 주로 면역계의 활동과 관련이 있으며, 면역 반응 및 염증 반응에 관련된 세포들로 구성되어 있습니다. PBMC는 바이오의약품 연구 및 임상 시험 등의 다양한 생명과학 연구 분야에서 사용되며, 질병의 이해와 치료법 개발에 중요한 정보를 제공합니다.

PBMC 분리 원리

PBMC 분리의 핵심 원리는 밀도 차이입니다. 혈액 내의 세포들이 서로 다른 밀도를 가지고 있기 때문에 이를 이용하여 분리해내는 것입니다. Ficoll을 넣고 원심 분리를 통해 샘플을 회전시키면 세포는 그림과 같이 형태로 각각의 층을 이루며 분리됩니다. 이때, 밀도가 높은 세포들은 그라디언트 용액의 하단으로 이동하게 되고, PBMC는 그라디언트 상단에 위치하여 수집됩니다. 이 과정을 통해 PBMC를 분리하게 되며, 이후 PBMC는 순수한 혈액 단핵세포로써 다양한 연구 및 실험에 활용됩니다.

PBMC 분리 프로세스

1. 혈액 채취: 우선적으로 PBMC를 분리하기 위해 혈액 채취가 필요합니다. 일반적으로 정맥 혈액이나 사람 또는 동물에서 혈액을 채취합니다. 이때 사용되는 시술 및 장비는 해당 규정 및 안전 지침에 따라야 합니다.

2. 혈액 희석: 채취한 혈액은 튜브나 용기에 넣은 후, 적정 부피의 생리식염수(또는 다른 적정한 용매)로 희석합니다. 이렇게 하면 샘플의 부피를 증가시키고, PBMC를 분리하는 과정에서 적혈구들이 충분히 혼합되어 밀도 경사를 형성할 수 있게 됩니다.

3. Picoll 층층 분리: Picoll은 일종의 밀도 경사 용액으로, 밀도가 높은 상층에 위치한 투명한 층과 밀도가 낮은 하층에 위치한 초록색 층으로 구성되어 있습니다. 용액을 소프트 튜브에 채우고 혈액 희석물을 조심스럽게 상층에 넣습니다. 이 과정에서 밀도 경사가 형성되고 PBMC는 픽콜과의 경계면에 위치하게 됩니다.

4. 원심 분리: 다음으로, 픽콜로 샘플을 원심 분리기로 옮깁니다. 이때 적정한 속도 및 시간을 설정하여 PBMC가 밀도 경사를 통해 분리되어 상단층에 층을 이루게 합니다. 이때 PBMC는 픽콜과의 경계면에 위치하게 됩니다.

5. PBMC 수거: 분리가 완료되면, PBMC가 층을 이룬 상단층을 조심스럽게 튜브에서 채취합니다. 이렇게 하면 PBMC를 분리하고, 이를 이후의 실험 또는 분석에 사용할 수 있습니다.

분리 작업이 끝나고 난 뒤 장기간 보관해야 할 때는 액체 질소 등을 이용하여 냉동 상태에서 보관합니다.

왜 숙련된 사람이 PBMC 분리를 하는 것이 중요한가요?

위의 그림에서 알 수 있듯이 PBMC는 매우 얇은 층을 형성하고 있습니다. 따라서 숙련된 인력이 PBMC 분리 업무를 맡지 않는다면 분리된 PBMC 안에 불순물이 포함되거나, 세포가 손실되거나 손상이 일어날 수 있습니다.

결과적으로는 데이터의 신뢰성이 훼손되어 실험을 추가 진행하기 위해 시간이나 비용이 추가적으로 소모될 수 있습니다. 휴사이언스는 이러한 점을 인지하여 숙련된 분석 인력이 PBMC 분리 업무를 맡고 있으며, 그렇기에 다수의 PBMC를 활용한 임상/연구 분석에서 우수한 임상 분석 데이타를 도출해낼 수 있었습니다.

이러한 분석 품질을 인정받아 현재 다수의 글로벌 CRO/Central Lab과 PBMC isolation과 관련된 파트너쉽을 논의 중에 있습니다.

PBMC로 어떤 것을 볼 수 있나요?

분리된 PBMC(Peripheral Blood Mononuclear Cells)는 다양한 의료 및 생명과학 분야에서 다양한 용도로 활용될 수 있습니다. 주요한 활용 분야는 면역학 연구, 약물 독성 테스트, 바이러스 감염 연구 등이 있습니다.

PBMC 분리와 활용한 임상 등을 계획 중이시라면, 지금 견적 문의를 시작해 보세요.